セルカウント・面積計測の効率化

大型の電動ステージを活用したウェルプレートの全面観察

顕微鏡で細胞を高倍率観察する際、視野が狭くなるためステージ座標を記録しながら部分的な観察を繰り返す必要があります。そのため、ウェルプレート全面を一望することと微細な細胞の高倍率観察を両立することは困難でした。高倍率で撮影した画像を画像処理によって1枚の画像につなぎ合わせて、広視野画像の獲得を試みるケースもありますが、手作業による連結作業は難易度が高いうえ、多くの時間を要します。こうしたことから、時間経過によって変化が生じる生細胞に影響することなく、いかにして素早くウェルプレート全面を観察するかが課題となっていました。

BZ-Xシリーズは、大型の電動ステージをX・Y・Z軸方向に制御しながら高倍率画像を高速に自動撮影して連結する「イメージジョイント」により、ウェルプレート全面の高解像度画像を簡単に取得することができます。広視野でのウェルプレート全面観察とコロニーが形成された箇所の高倍率像をシームレスに行き来することができるため、形成されたコロニーを見逃したり、座標を見失ったりすることなくスムーズな観察が可能です。
また、マルチウェルプレートの複数のウェルに対する一括イメージジョイントも自動で実行することができます。

ウェルプレート全面におけるiPS細胞のセルカウント・面積計測の効率化事例

時間経過による生細胞や生菌の変化は、ウェルプレート内の解析結果と評価に影響するため、素早く定量的に解析結果を得ることが重要です。
下の画像はBZ-Xシリーズのイメージジョイントで得たiPS細胞のウェルプレート全面像に対し、「ハイブリッドセルカウント」を用いて自動でカウントや面積計測を実施した例です。広視野観察から、ウェルプレート全面におけるコロニーの個数や面積の平均・標準偏差・総数の値を定量的に計測して、素早く解析結果を取得することができます。これにより、手動カウントにかかる膨大な時間や労力、そしてヒューマンエラー発生のリスク排除が可能です。

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   個数

   251個

   平均面積

   8,315µm²

   面積標準偏差

   12,652µm²

   面積総数

   2,086,967µm²

マルチウェルプレートを使用する場合、BZ-Xシリーズの「マクロセルカウント」を用いることにより、1枚の画像と同一条件で、他の複数の画像を一括で自動計測することができます。
従来は複数のウェルにおける解析に膨大な時間と手間を要すうえ、計測者によって解析結果や評価にバラつきが生じてしまうことが課題でしたが、BZ-Xシリーズであれば、定量的な計測と評価を簡単にかつ短時間で実現します。

同一条件で一括計測